微基生物子公司研發(fā)的格微®糞便微生物DNA常溫保存液有效的保證糞便樣品中微生物的DNA在常溫環(huán)境下不被降解,糞便樣本中微生物的數(shù)量,組成和豐度保持穩(wěn)定,保證腸道菌群測(cè)序后數(shù)據(jù)分析的準(zhǔn)確性。

格微®糞便微生物DNA保存液應(yīng)用實(shí)例 

采取兩個(gè)志愿者的新鮮糞便（取后排出的中間部分，避免糞便表面的黏膜，更能很好的體現(xiàn)腸道微生物類群），分別分裝為12管，其中3管立即凍存于-20℃，作為平行實(shí)驗(yàn)及正對(duì)照，其余9管置于37℃水浴鍋中，恒溫保存3天，7天，14天。取樣后立即凍存于-20℃，用于后續(xù)基因組抽提。

采取QIAamp DNA Stool Mini Kit進(jìn)行基因組抽提，電泳檢測(cè)進(jìn)行質(zhì)控，結(jié)果如下圖所示，濃度為10-20ng/uL。

以抽提基因組DNA為模板，進(jìn)行16S V4-V5區(qū)擴(kuò)增，并通過PCR擴(kuò)增的方法添加測(cè)序所需接頭，PCR結(jié)果如下圖所示：

將PCR產(chǎn)物回收定量等摩爾比混勻，質(zhì)控合格的文庫進(jìn)行illumina Miseq測(cè)序。

拿到測(cè)序的結(jié)果，序列拼接和質(zhì)控后，進(jìn)行生物信息學(xué)和統(tǒng)計(jì)分析：

通過聚類OUT的α多樣性分析

相同樣本在保存液中保存14天結(jié)果與新鮮凍存的樣本無顯著差異（P>0.05）。

Alpha多樣性（Alpha diversity）是對(duì)單個(gè)樣品中物種多樣性的分析，其中shannon index和Simpson index是對(duì)物種richness進(jìn)行分析，ace和chao是對(duì)物種diversity進(jìn)行分析。

基于系統(tǒng)發(fā)育的β多樣性分析

通過PCoA分析，發(fā)現(xiàn)weighted UniFrac和unweighted UniFrac的結(jié)果顯示，不同處理時(shí)間樣本之間的相似性很高，圖中每個(gè)樣本的不同處理分別聚在一起。新鮮凍存與37℃處理14天從系統(tǒng)發(fā)育角度看無顯著差異。

Beta多樣性（Beta diversity）分析是用來比較樣品之間在物種多樣性方面存在的差異大小。UniFrac是通過利用系統(tǒng)進(jìn)化的信息來比較樣品間的物種群落差異。UniFrac結(jié)果分為加權(quán)UniFrac（weighted UniFrac）與非加權(quán)UniFirac（unweighted UniFrac）2種，其中weighted UniFrac考慮了序列的豐度，unweighted UniFrac不考慮序列豐度。

對(duì)物種分類信息進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析

在門、綱、目、科、屬各水平的細(xì)菌相對(duì)豐度構(gòu)成圖中，每個(gè)柱子為一個(gè)處理三個(gè)重復(fù)的均值，不同顏色代表不同的物種，物種信息可見圖例，若某一種細(xì)菌占的比例多，則其在柱子中所占的比例就會(huì)更大。

基于細(xì)菌豐富度、多樣性、系統(tǒng)發(fā)育、菌群關(guān)系以及菌屬構(gòu)成，表明微基生物自主研發(fā)的糞便微生物DNA保存液可實(shí)現(xiàn)對(duì)DNA完整性的有效保存。

產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)

1 可在常溫下采集、保存糞便樣品，保護(hù)樣本中微生物DNA不被降解；

2 使用簡單，可把糞便樣品直接浸入微生物常溫保存液中，保護(hù)樣品中微生物；

3 從保存液中提得的微生物DNA后繼可用于酶切和PCR等多種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)；

4 保存管、采集勺均為無菌產(chǎn)品，最大程度減少了耗材中微生物及微生物殘留DNA對(duì)樣

品的污染；

5 用途廣泛，可廣泛用于醫(yī)院、家庭、高校、科研院所等常溫條件下糞便樣品的采集保存。

應(yīng)用案例

以下科研文章均使用了微基生物子公司研發(fā)的糞便微生物DNA常溫保存液。使用保存液大大方便了樣本的收集與保存，確保了研究中微生物DNA的穩(wěn)定性和研究結(jié)果的準(zhǔn)確性。這些文章涵蓋了從兒童早發(fā)育、慢性自發(fā)性蕁麻疹到焦慮樣障礙等多個(gè)領(lǐng)域的研究。糞便微生物DNA常溫保存液為微生物組研究提供了強(qiáng)有力的樣本保護(hù)方案。

產(chǎn)品詳情

Fecal samples were collected within three minutes after defecation using sterile stool preservation tubes that contain stool preservation fluid and have a sterile spoon attached to the lid (GeWei Bio-Tech(shanghai) Co. Ltd.,China, Product No.GWFO1-A). 

1 Zhu, L., et al. (2024). Gut microbiota facilitate chronic spontaneous urticaria. Nature Communications, 15, 112.  

2  Weng, H., et al. (2024). Humid heat environment causes anxiety-like disorder via impairing gut microbiota and bile acid metabolism in mice. Nature Communications, 15, 5697.

3  Wu et al. (2024). Investigation of Human Milk as a Biological System in a Multicenter Mother–Infant Cohort: Protocol Design and Cohort Profile of the Phoenix Study. Nutrients, 16(17), 2892.  

揭秘腸道微生物奧秘：糞便微生物DNA常溫保存液，讓研究更精準(zhǔn)、更便捷！

實(shí)測(cè)！糞便微生物DNA常溫保存液是一種高效便捷的樣本保存方式，首發(fā)于微基生物。

本產(chǎn)品含有糞便樣品采集、保存所需的保存液和耗材，該產(chǎn)品可用于室溫條件下糞便微生物樣品的采集和保存。本產(chǎn)品使用簡單方便，可廣泛用于醫(yī)院、家庭、科研院所等常溫條件下糞便微生物樣品的采集與保存。

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口腔微生物DNA采集保存套裝

本產(chǎn)品含有口腔微生物采集、保存所需的耗材和保存液，可在常溫條件下保存口腔微生物樣品的DNA。本產(chǎn)品安全可靠，使用簡單方便，可廣泛用于醫(yī)院、家庭、科研院所等口腔微生物樣品的采集與保存。

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皮膚微生物采集保存套裝

本產(chǎn)品含有皮膚微生物采集、保存所需耗材及保存液，可在常溫條件下采集、保存皮膚微生物樣品，防止樣品中的微生物發(fā)生變化。本產(chǎn)品使用簡單方便，可廣泛用于醫(yī)院、家庭、科研院所等皮膚微生物樣品的采集與保存。

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生殖道微生物采集保存套裝

本產(chǎn)品含有生殖道微生物采集、保存所需耗材及保存試劑?？稍诔貤l件下保存樣本中微生物DNA。本產(chǎn)品使用簡單方便，可廣泛用于醫(yī)院、家庭、科研院所等常溫條件下生殖道微生物樣品的采集與保存。

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土壤微生物采集保存套裝

本產(chǎn)品含有土壤微生物采集、保存所需的耗材和保存液，可在常溫條件下保存土壤微生物樣品的DNA。本產(chǎn)品安全可靠，使用簡單方便，可廣泛用于野外、科研院所、高校等常溫條件下土壤微生物的采集與保存。

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活菌保存液

活菌保存液適用于樣本中微生物分離培養(yǎng)前的保存。我們提供糞便微生物,口腔微生物,皮膚微生物,生殖道微生物,土壤微生物等各種樣本的活菌,厭氧活菌保存液。糞便，土壤及液體樣本，樣本采集后上下顛倒，使樣本與保存液充分混勻。拭子類樣本采集完成后，將采集拭子頭折斷放入含保存液的保存管中。每一個(gè)采集拭子放入單獨(dú)一個(gè)保存管內(nèi)。

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采集耗材&試劑，首發(fā)于微基生物。

產(chǎn)品選擇：

產(chǎn)品 編號(hào)	產(chǎn)品名稱	應(yīng)用范圍	產(chǎn)品尺寸/規(guī)格	數(shù)量	保存 條件	樣品裝入后 保存條件	寄送方式
GXF-07A	糞便微生物需氧活菌保存管	分離培養(yǎng)用，≤3g糞便	15mL（7mL保存液）	6 支/盒	-80/-20℃凍存	-80℃保存1年， 避免反復(fù)凍融	干冰
GXF-07B	糞便微生物需氧活菌保存管	分離培養(yǎng)用，≤3g糞便	15mL（7mL保存液）	24 支/盒	-80/-20℃凍存	-80℃保存1年， 避免反復(fù)凍融	干冰
GYF-07A	糞便微生物厭氧活菌保存管	分離培養(yǎng)用，≤3g糞便	15mL（7mL保存液）	6 支/盒	-80/-20℃凍存	-80℃保存1年， 避免反復(fù)凍融	干冰
GYF-07B	糞便微生物厭氧活菌保存管	分離培養(yǎng)用，≤3g糞便	15mL（7mL保存液）	24 支/盒	-80/-20℃凍存	-80℃保存1年， 避免反復(fù)凍融	干冰
GXF-03A	糞便微生物需氧活菌保存管	分離培養(yǎng)用，≤3g糞便	5mL（3mL保存液）	6 支/盒	-80/-20℃凍存	-80℃保存1年， 避免反復(fù)凍融	干冰
GXF-03B	糞便微生物需氧活菌保存管	分離培養(yǎng)用，≤3g糞便	5mL（3mL保存液）	24 支/盒	-80/-20℃凍存	-80℃保存1年， 避免反復(fù)凍融	干冰
GYF-03A	糞便微生物厭氧活菌保存管	分離培養(yǎng)用，≤3g糞便	5mL（3mL保存液）	6 支/盒	-80/-20℃凍存	-80℃保存1年， 避免反復(fù)凍融	干冰
GYF-03A	糞便微生物厭氧活菌保存管	分離培養(yǎng)用，≤3g糞便	5mL（3mL保存液）	24 支/盒	-80/-20℃凍存	-80℃保存1年， 避免反復(fù)凍融	干冰
GXO-01A	口腔微生物需氧活菌采集保存套裝	分離培養(yǎng)用，拭子或牙菌斑采樣保存	2mL（1mL保存液）	6 支/盒	-80/-20℃凍存	-80℃保存1年， 避免反復(fù)凍融	干冰
GXO-01B	口腔微生物需氧活菌采集保存套裝	分離培養(yǎng)用，拭子或牙菌斑采樣保存	2mL（1mL保存液）	24 支/盒	-80/-20℃凍存	-80℃保存1年， 避免反復(fù)凍融	干冰
GYO-01A	口腔微生物厭氧活菌采集保存套裝	分離培養(yǎng)用，拭子或牙菌斑采樣保存	2mL（1mL保存液）	6 支/盒	-80/-20℃凍存	-80℃保存1年， 避免反復(fù)凍融	干冰
GYO-01B	口腔微生物厭氧活菌采集保存套裝	分離培養(yǎng)用，拭子或牙菌斑采樣保存	2mL（1mL保存液）	24 支/盒	-80/-20℃凍存	-80℃保存1年， 避免反復(fù)凍融	干冰
GXS-01A	皮膚微生物需氧活菌采集保存套裝	分離培養(yǎng)用，拭子采樣保存	1.5mL（1mL保存液）+潤濕液0.5ml（0.05ml保存液）	6 套/盒	-80/-20℃凍存	-80℃保存1年， 避免反復(fù)凍融	干冰
GXS-01B	皮膚微生物需氧活菌采集保存套裝	分離培養(yǎng)用，拭子采樣保存	1.5mL（1mL保存液）+潤濕液0.5ml（0.05ml保存液）	24 套/盒	-80/-20℃凍存	-80℃保存1年， 避免反復(fù)凍融	干冰
GYS-01A	皮膚微生物厭氧活菌采集保存套裝	分離培養(yǎng)用，拭子采樣保存	1.5mL（1mL保存液）+潤濕液0.5ml（0.05ml保存液）	6套/盒	-80/-20℃凍存	-80℃保存1年， 避免反復(fù)凍融	干冰
GYS-01B	皮膚微生物厭氧活菌采集保存套裝	分離培養(yǎng)用，拭子采樣保存	1.5mL（1mL保存液）+潤濕液0.5ml（0.05ml保存液）	24 套/盒	-80/-20℃凍存	-80℃保存1年， 避免反復(fù)凍融	干冰
GXR-01A	生殖道微生物需氧活菌采集保存套裝	分離培養(yǎng)用，拭子采樣保存	2mL（1mL保存液）	6 套/盒	-80/-20℃凍存	-80℃保存1年， 避免反復(fù)凍融	干冰
GXR-01B	生殖道微生物需氧活菌采集保存套裝	分離培養(yǎng)用，拭子采樣保存	2mL（1mL保存液）	24 套/盒	-80/-20℃凍存	-80℃保存1年， 避免反復(fù)凍融	干冰
GYR-01A	生殖道微生物厭氧活菌采集保存套裝	分離培養(yǎng)用，拭子采樣保存	2mL（1mL保存液）	6 套/盒	-80/-20℃凍存	-80℃保存1年， 避免反復(fù)凍融	干冰
GYR-01B	生殖道微生物厭氧活菌采集保存套裝	分離培養(yǎng)用，拭子采樣保存	2mL（1mL保存液）	24 套/盒	-80/-20℃凍存	-80℃保存1年， 避免反復(fù)凍融	干冰
GXE-07A	土壤微生物需氧活菌保存管	分離培養(yǎng)用，≤3g土壤	15mL（7mL保存液）	6 支/盒	-80/-20℃凍存	-80℃保存1年， 避免反復(fù)凍融	干冰
GXE-07B	土壤微生物需氧活菌保存管	分離培養(yǎng)用，≤3g土壤	15mL（7mL保存液）	24 支/盒	-80/-20℃凍存	-80℃保存1年， 避免反復(fù)凍融	干冰
GYE-07A	土壤微生物厭氧活菌保存管	分離培養(yǎng)用，≤3g土壤	15mL（7mL保存液）	6 支/盒	-80/-20℃凍存	-80℃保存1年， 避免反復(fù)凍融	干冰
GYE-07B	土壤微生物厭氧活菌保存管	分離培養(yǎng)用，≤3g土壤	15mL（7mL保存液）	24 支/盒	-80/-20℃凍存	-80℃保存1年， 避免反復(fù)凍融	干冰
GXE-03A	土壤微生物需氧活菌保存管	分離培養(yǎng)用，≤3g土壤	5mL（3mL保存液）	6 支/盒	-80/-20℃凍存	-80℃保存1年， 避免反復(fù)凍融	干冰
GXE-03B	土壤微生物需氧活菌保存管	分離培養(yǎng)用，≤3g土壤	5mL（3mL保存液）	24 支/盒	-80/-20℃凍存	-80℃保存1年， 避免反復(fù)凍融	干冰
GYE-03A	土壤微生物厭氧活菌保存管	分離培養(yǎng)用，≤3g土壤	5mL（3mL保存液）	6 支/盒	-80/-20℃凍存	-80℃保存1年， 避免反復(fù)凍融	干冰
GYE-03B	土壤微生物厭氧活菌保存管	分離培養(yǎng)用，≤3g土壤	5mL（3mL保存液）	24 支/盒	-80/-20℃凍存	-80℃保存1年， 避免反復(fù)凍融	干冰
GXM-07A	牛奶微生物需氧活菌保存管	分離培養(yǎng)用，采集奶樣≤7mL	15mL（7mL保存液）	6 支/盒	-80/-20℃凍存	-80℃保存1年， 避免反復(fù)凍融	干冰
GXM-07B	牛奶微生物需氧活菌保存管	分離培養(yǎng)用，采集奶樣≤7mL	15mL（7mL保存液）	24 支/盒	-80/-20℃凍存	-80℃保存1年， 避免反復(fù)凍融	干冰
GYM-07A	牛奶微生物厭氧活菌保存管	分離培養(yǎng)用，采集奶樣≤7mL	15mL（7mL保存液）	6 支/盒	-80/-20℃凍存	-80℃保存1年， 避免反復(fù)凍融	干冰
GYM-07B	牛奶微生物厭氧活菌保存管	分離培養(yǎng)用，采集奶樣≤7mL	15mL（7mL保存液）	24 支/盒	-80/-20℃凍存	-80℃保存1年， 避免反復(fù)凍融	干冰
GXN-07A	尿液微生物需氧活菌保存管	分離培養(yǎng)用，采集尿液≤7mL	15mL（7mL保存液）	6 支/盒	-80/-20℃凍存	-80℃保存1年， 避免反復(fù)凍融	干冰
GXN-07B	尿液微生物需氧活菌保存管	分離培養(yǎng)用，采集尿液≤7mL	15mL（7mL保存液）	24 支/盒	-80/-20℃凍存	-80℃保存1年， 避免反復(fù)凍融	干冰
GYN-07A	尿液微生物厭氧活菌保存管	分離培養(yǎng)用，采集尿液≤7mL	15mL（7mL保存液）	6 支/盒	-80/-20℃凍存	-80℃保存1年， 避免反復(fù)凍融	干冰
GYN-07B	尿液微生物厭氧活菌保存管	分離培養(yǎng)用，采集尿液≤7mL	15mL（7mL保存液）	24 支/盒	-80/-20℃凍存	-80℃保存1年， 避免反復(fù)凍融	干冰

操作指南

1. 活菌保存液收貨后保存

收到試劑后將試劑放置-20℃冰箱保存。

2. 取樣前準(zhǔn)備事項(xiàng)

在使用前4-12 h從-20℃冰箱內(nèi)取出，放置4℃冰箱解凍。

3. 樣本采集

按照相應(yīng)的樣本取樣說明，進(jìn)行樣本采集。

糞便，土壤及液體樣本，樣本采集后上下顛倒，使樣本與保存液充分混勻。

拭子類樣本采集完成后，將采集拭子頭折斷放入含保存液的保存管中。每一個(gè)采集拭子放入單獨(dú)一個(gè)保存管內(nèi)。

4. 取樣后存放

置于保存液中的樣品請(qǐng)立即放置–80℃冰箱保存。

5. 批次取樣的存儲(chǔ)

分批取樣的樣本每次使用自封袋或凍存盒封存，注明取樣時(shí)間及編號(hào)?？纱袠颖臼占戤吅?，一同寄送。

6. 樣品寄送

–80℃冰箱內(nèi)取出的樣本避免反復(fù)凍融。在發(fā)快遞時(shí)使用干冰寄送，全程保持冷鏈。

活菌分離培養(yǎng)前的采集保存耗材&試劑，首發(fā)于微基生物。

收集在活菌保存液內(nèi)的樣本適用于微生物分離培養(yǎng)前的保存。按照不同的樣本類型及待分離微生物生理生化要求,將樣本保存在相應(yīng)的樣本保存液內(nèi)。其中厭氧保存液中氧濃度極低，可保證樣本中大量厭氧微生物在接近無氧的狀態(tài)下有更高的存活率?；罹４嬉嚎蓮V泛用于醫(yī)院、科研院所等樣本中微生物的采集和活菌的保存，方便后繼樣本中菌體的培養(yǎng)、分離。

將采集后含樣本的采集管(樣本管)放入-80℃冰箱進(jìn)行低溫保存。分批取樣的樣本管每次使用自封袋或凍存盒封存，注明取樣時(shí)間及編號(hào)?？纱袠颖臼占戤吅螅煌乃?。注意在樣本凍存及寄送期間，請(qǐng)勿反復(fù)凍融。

送樣時(shí)請(qǐng)盡量使用冰盒（泡沫盒+干冰+冰袋），以保證運(yùn)輸過程中的低溫條 件（干冰的揮發(fā)消耗量約為 3 公斤/天）。在打包時(shí)先放入足量的干冰，之后用冰 袋填充泡沫盒中間的空隙。天氣較為炎熱時(shí)，建議采用厚一點(diǎn)的泡沫盒。

活菌保存，首發(fā)于微基生物。

1 樣本的采集

采集前注意至少近一周沒有口服或局部使用抗生素，近一個(gè)月未口服或局部使用雌、孕激素，近3天沒有性生活、無盆浴、陰道沖洗或陰道用藥；未在經(jīng)期。取樣前將無菌拭子在取樣部位擦拭10-20次，并在擦拭過程中旋轉(zhuǎn)拭子，使采樣部位的微生物均勻附著在拭子頭部。采集完成后，將采集拭子頭放入含保存液的保存管除,在折痕處折斷,保留拭子頭在保存管中，丟棄拭子柄。蓋上保存管蓋子,手動(dòng)上下震蕩 10-20次，使保存液充分浸潤拭子頭。取樣后，保存液中的樣品在常溫下可保存14天，在-20℃和-80℃下可長期冷凍保存。

進(jìn)行宏基因測(cè)序的生殖道拭子樣本,同一受試者需要采集取2-3根拭子。

2 樣本的保存和寄送

將樣本放入-80℃冰箱進(jìn)行低溫保存，若條件不允許，可短期（1 個(gè)月內(nèi)）在-20℃冰箱中冷凍保存。注意在樣本凍存期間，請(qǐng)勿反復(fù)凍融。

送樣時(shí)請(qǐng)盡量使用冰盒（泡沫盒+干冰+冰袋），以保證運(yùn)輸過程中的低溫條 件（干冰的揮發(fā)消耗量約為 3 公斤/天）。在打包時(shí)先放入足量的干冰，之后用冰 袋填充泡沫盒中間的空隙。天氣較為炎熱時(shí)，建議采用厚一點(diǎn)的泡沫盒。

若無法實(shí)現(xiàn)低溫保存，可以采用微基生物研發(fā)的微生物 DNA 常溫保存液， 可以實(shí)現(xiàn)樣本微生物DNA檢測(cè)的常溫保存和運(yùn)輸。

生殖道微生物，首發(fā)于微基生物。