日韩一区二区三区福利小视频,老司机精品在线亚洲视频免费,中文字幕一区二区三区精品,精品国产又大又黄又粗av,国产mm1314无码视频在线观看,国产精品扒腿做爽爽爽视频 http://www.jungeng.cn 您自己的微生態(tài)研究團隊|專注微生態(tài)研究與應(yīng)用 Tue, 31 Mar 2026 06:24:06 +0000 zh-CN hourly 1 https://wordpress.org/?v=4.2.29 低偏差擴增建庫 http://www.jungeng.cn/lea-seq/lea-pcr http://www.jungeng.cn/lea-seq/lea-pcr#comments Mon, 25 Aug 2014 06:16:23 +0000 http://tinygenetest.gotoip2.com./?p=228 采用二代測序（Next Generation Sequencing，NGS）進行微生物多樣性研究，文庫制備至關(guān) …

低偏差擴增建庫，首發(fā)于微基生物。

]]> 采用二代測序（Next Generation Sequencing，NGS）進行微生物多樣性研究，文庫制備至關(guān)重要。在高通量測序過程中，文庫構(gòu)建需要PCR擴增對原始樣本序列進行指數(shù)放大，而在此過程中產(chǎn)生的差異也是必不可免的，他決定了樣本中微量或是痕量微生物是否被檢測，測序結(jié)果是否能真實地反應(yīng)樣本中微生物的存在情況。較傳統(tǒng)PCR擴增不同，微基生物采用頂級期刊science發(fā)表的文章中低偏差擴增測序（Low Error Amplicon Sequencing，LEA-Seq）方法，這種建庫方法更真實的反應(yīng)環(huán)境中微生物的存在。

LEA-Seq擴增原理：特異引物融合測序引物和二代測序儀器所必須的adaptor后是一條長度將近100bp的引物，引物過長PCR擴增效果會相對降低。所以LEA-Seq方法是將引物設(shè)計成兩條相對較短的引物，分別包括正向內(nèi)側(cè)引物，正向外側(cè)引物，反向內(nèi)側(cè)引物，反向外側(cè)引物。首先利用低濃度的正向內(nèi)側(cè)引物，對目的片段進行少數(shù)循環(huán)的線性擴增，隨后加入正向外側(cè)引物、反向內(nèi)側(cè)引物及反向外側(cè)引物進行目的片的指數(shù)擴增，詳細描述可參見參考文獻。

 

LEA-PCR

參考文獻：The Long-Term Stability of the Human Gut Microbiota. Science

低偏差擴增建庫，首發(fā)于微基生物。

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