答:OTU(Operational Taxonomic Units)是在系統(tǒng)發(fā)生學(xué)研究或群體遺傳學(xué)研究中,為了便于進行分析,人為給某一個分類單元(品系,種,屬,分組等)設(shè)置的同一標志。
PCA即主成分分析。將多個變量通過線性變換以選出較少個數(shù)重要變量的一種多元統(tǒng)計分析方法。
RDA即冗余分析,對比主成分分析可以發(fā)現(xiàn),其實冗余分析就是約束化的主成分分析。
2、什么是Reads、Run、Barcode?
答:Reads: 高通量測序平臺產(chǎn)生的序列標簽就稱為reads。
Run:指高通量測序平臺單次上機測序反應(yīng)。
Barcode:與Index同義,多指在Roche GS FLX 454測序平臺的16S PCR產(chǎn)物的測序過程中接頭序列所包含的的用來區(qū)分不同樣本的序列。
3、什么是高通量測序(NGS)?
答:高通量測序技術(shù)是對傳統(tǒng)Sanger測序革命性的改變, 一次對幾十萬到幾百萬條核酸分子進行序列測定, 因此在有些文獻中稱其為下一代測序技術(shù)(next generation sequencing,NGS )足見其劃時代的改變, 同時高通量測序使得對一個物種的轉(zhuǎn)錄組和基因組進行細致全貌的分析成為可能, 所以又被稱為深度測序(Deep sequencing)。
4、高通量測序平臺和DGGE分析環(huán)境微生物多樣性,它們之間的區(qū)別?
答:一般認為土壤、海洋、腸道等生態(tài)系統(tǒng)中的微生物數(shù)量繁多、種類多樣。傳統(tǒng)的培養(yǎng)方法只限于對環(huán)境樣品中極少部分(0.1%-1%)可培養(yǎng)的微生物類群的研究。 DGGE技術(shù)操作復(fù)雜、成本高、痕量菌發(fā)現(xiàn)困難,在其實驗結(jié)果中往往只含有數(shù)十條條帶,只能反映出樣品中的優(yōu)勢種群,也無法得到細菌種類的絕對數(shù)量。而高通量測序技術(shù)能同時對樣品中的優(yōu)勢種群及微量的劣勢種群進行檢測,獲得樣品中的微生物群落組成,并將其含量進行數(shù)字化,而且每個樣品的測序量達到普通測序的幾百倍,而單條序列的測序費用遠低于普通測序。
5、Misq平臺和羅氏454平臺之間的區(qū)別在于?
答:羅氏454高通量測序技術(shù)能同時對樣品中的優(yōu)勢物種、稀有物種及一些未知的物種進行檢測,獲得樣品中的微生物群落組成,并將其含量進行數(shù)字化。測序費用比較高,后期數(shù)據(jù)分析比較麻煩。MiSeq高通量測序平臺集中了Roche 454和Illumina HiSeq 2500的優(yōu)點,不僅可實現(xiàn)對多樣品的多個可變區(qū)同時測序,而且在測序速度和測序通量上都有進一步提升,而且測序費用相對于羅氏454便宜很多,后繼分析沒有那么麻煩。
6、做高通量平臺分析整個實驗周期是多少天?
答:根據(jù)不同客戶的要求,實驗周期也不盡相同。我們在接到客戶提供的樣品后,即刻進行實驗,至全部實驗及數(shù)據(jù)分析結(jié)束,一般控制在40個工作日內(nèi)完成。
7、需要多少測序量?
答:由于不同環(huán)境樣品的物種成分、豐度都各不相同,所需的測序量也不一樣。我們會根據(jù)合作伙伴樣品的具體情況及研究目的,進行測序深度數(shù)據(jù)庫檢索,給合作伙伴提供合理建議。
8、測序條數(shù)?
答:我們保證單個樣本測序條數(shù)高于1.8萬條/樣本,樣本平均測序條數(shù)高于3萬條/樣本。同時可以按照客戶需求增加測序條數(shù)。
9、實驗結(jié)果含那些數(shù)據(jù)?
答:我公司提供以下數(shù)據(jù)分析:
a. 匯總統(tǒng)計全部的測序結(jié)果。
b. 將全部序列進行比對,進行聚類/OTU劃分, 列出每個OTU的代表序列。
c. 種屬鑒定,與SILVA數(shù)據(jù)庫進行比對,判斷每類OTU詳細的分類信息。
d. 熱圖分析
e. PCA分析
f. 根據(jù)測序序列與標準菌株序列,建立系統(tǒng)發(fā)育樹分析。
h. VENN 圖
i. RDA 分析




微基生物在2016年初嘗試建立腸道菌群的厭氧培養(yǎng)分離服務(wù),目前已經(jīng)建成成熟的分離培養(yǎng)體系,已開發(fā)39種培養(yǎng)基、78種培養(yǎng)條件,可以分離培養(yǎng)出40%—80%左右的腸道菌群,目前在初步構(gòu)建腸道菌群菌種庫。 技術(shù)平臺: 厭氧培養(yǎng)系統(tǒng)
技術(shù)平臺: 厭氧培養(yǎng)系統(tǒng)