活性淤泥、菌體/菌液微生物采用傳統(tǒng)培養(yǎng)方法難以全面、準確地反映微生物群落結(jié)構(gòu)與功能狀態(tài)。微基生物依托前沿的熒光原位雜交(FISH)技術(shù),針對性推出活性淤泥、菌體/菌液微生物FISH檢測+涂片制備服務。該服務無需復雜的培養(yǎng)流程,即可實現(xiàn)微生物原位定位與定性分析,最大程度保留樣本中微生物的原始狀態(tài)。
客戶僅需要提供活性淤泥混合液、菌體/菌液樣本,后續(xù)的涂片制備、FISH 檢測、結(jié)果分析等全流程專業(yè)操作,均由微基生物團隊完成,為客戶節(jié)省時間與技術(shù)成本的同時,確保檢測結(jié)果的準確性與可靠性。

FISH技術(shù)檢測原理
FISH(熒光原位雜交)技術(shù)基于核酸分子雜交原理,通過針對樣本中目標微生物(如硝化菌、反硝化菌等功能微生物)的16SrRNA基因序列設計出與目標微生物特異性核酸序列互補的熒光標記探針,利用帶有熒光標記的特異性寡核苷酸探針,讓探針與樣本中目標微生物的核酸在適宜條件下發(fā)生特異性結(jié)合。通過熒光顯微鏡,可直接在細胞原位觀察到熒光信號,從而精準定位目標微生物,同時實現(xiàn)微生物的定性識別與定量分析,清晰反映樣本中微生物群落結(jié)構(gòu)與功能狀態(tài)。
微基生物自主研發(fā)熒光原位雜交檢測試劑盒,可根據(jù)客戶具體檢測需求(如特定功能菌分析、復雜群落解析)定制具體方案,確保檢測結(jié)果的針對性與可靠性。
樣本采集
2 活性淤泥混合液:50-100mL,需充分混合均勻后采集,確保樣本具有代表性。采集取混合均勻的淤泥層,嚴格避免采集表層浮渣(含大量死菌及雜質(zhì))或底部沉泥(群落結(jié)構(gòu)單一),確保樣本反映真實微生物狀態(tài)。
2 細菌樣本(菌體/菌液):濃縮菌液/菌體,一定體積的菌液,或菌體懸濁液,離心后菌體沉淀肉眼可見沉淀(建議菌濕重5mg以上),PBS洗滌后,采用終濃度15%-25%甘油重懸,-80℃凍存。
注:使用無菌采樣工具(如無菌離心管、采樣勺),避免外界微生物污染;采集后立即密封離心管,避免樣本暴露于空氣超過30min,防止微生物活性受影響。
樣本保存
短期保存:將樣本置于2-8℃冰箱中保存,保存時間≤48h,保存期間需每隔12h輕輕搖勻1次,防止微生物沉降;
長期保存:向樣本中加入終濃度20%的甘油,-80℃冷凍保存,保存時間≤3個月,檢測前需室溫緩慢解凍,避免反復凍融。
檢測結(jié)果可視化
微生物整體分布與目標菌定位

藍色熒光(DAPI染色):呈現(xiàn)活性淤泥中所有微生物的整體分布;紅色熒光(FISH探針標記):定位目標功能微生物。圖像疊加可直接觀察目標菌在總?cè)郝渲械奈恢门c占比,快速判斷目標菌的存活狀態(tài)與富集情況。
微基生物聚焦微生物檢測領(lǐng)域,致力于為客戶提供微生物 FISH 檢測全流程一站式服務。針對動物組織、腫瘤、根系、菌液、菌體、活性淤泥等多類型樣本,我們還可提供專業(yè)的制備服務,助力樣本處理更高效、檢測結(jié)果更精準。如有檢測需求,可通過官網(wǎng)咨詢或撥打服務熱線021-50763698,獲取專屬技術(shù)支持。
參考:Nielsen, J. L., Seviour, R. J., & Nielsen, P. H. (2016). 7 Microscopy. In M. C. M. van Loosdrecht, P. H. Nielsen, C. M. Lopez-Vazquez, & D. Brdjanovic (Eds.), Experimental Methods in Wastewater Treatment (pp. 264-284). IWA Publishing.

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