胃粘膜樣本和組織樣本的采集保存方法

 1 樣本的采集

根據(jù)實(shí)驗(yàn)的目的，確定選擇受試者的條件，如考慮年齡、性別、有無特殊疾病史等因素。根據(jù)考慮的因素，選擇符合條件的受試者。向受試者交代實(shí)驗(yàn)的目的、過程、風(fēng)險(xiǎn)、收益及退出機(jī)制等，確保受試者理解全部實(shí)驗(yàn)內(nèi)容，待受試者簽訂知情同意書后開始取樣。

由于胃部粘膜樣本和組織樣本在取樣時(shí)，取樣的大小不同，后續(xù)的 DNA 抽提方法不同，因此采樣方法也不相同。

1.1 胃部粘膜樣本

在做胃鏡檢查前需禁食 12 小時(shí)，且未服用任何影響胃內(nèi)菌群的藥物。 用無菌的胃鏡鉗取胃部粘膜組織樣本，胃竇樣本取距離幽門 2-3cm 處的粘膜組織，胃體樣本取距離胃食道結(jié)合部 10cm 處大彎側(cè)的粘膜組織，樣本大小至少為 2mm*1mm，置于無菌 EP 管或凍存管中，做好標(biāo)記，放入液氮罐中進(jìn)行保存。 當(dāng)取材結(jié)束后，將樣本轉(zhuǎn)運(yùn)到實(shí)驗(yàn)室，放入-80℃冰箱進(jìn)行低溫保存。注意在樣本凍存期間，請勿反復(fù)凍融。

1.2 組織樣本

取待測的組織樣本放入微基生物提供的裝有保存液的室溫保存管中，樣本加入后，保存液上升體積，不能超過原保存液體積的 1/3，在樣本加入后，請充分 振蕩，使樣本全部浸沒在保存液中。

裝有保存管的樣本，可在室溫下存放 14 天，樣本的菌群結(jié)構(gòu)保持穩(wěn)定。如
需長期保存，將放有樣本的保存液，放入-80℃冰箱長期（1 年內(nèi)）凍存，或短期（3 月內(nèi)）放于-20℃冰箱中。注意在樣本凍存期間，請勿反復(fù)凍融。

*如需保存活菌，需使用活菌保存管，并請盡快將樣本及保存液放置于-80℃冰箱中，避免反復(fù)凍融。

 2 樣本的保存和寄送

送樣時(shí)請盡量使用冰盒（泡沫盒+干冰+冰袋），以保證運(yùn)輸過程中的低溫條件（干冰的揮發(fā)消耗量約為 3 公斤/天）。在打包時(shí)先放入足量的干冰，之后用冰袋填充泡沫盒中間的空隙，為了保持冰盒中的低溫環(huán)境，建議采用較厚的泡沫盒。

 參考文獻(xiàn)

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